專利名稱：一種皮膚美白用化妝品成分的組成物的制作方法
技術領域：
本發明是關于化妝品成分的組成物，更確切的說是關于含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的皮膚美白用化妝品成分的組成物。人的皮膚、毛發及眼睛等部位體現的顏色是由黑色素、角蛋白及血紅蛋白所決定。其中，最重要的因素是黑色素。膚色是由黑色素的量和性質及分布程度來決定的。
背景技術：
人的皮膚變黑的主要原因是由于這種黑色素的合成，即當皮膚裸露在紫外線下時從皮膚表皮中的膠質細胞中分泌出促進黑色素的生成因子。這種因子刺激黑素細胞而合成黑色素，由于這種黑色素釋放到皮膚表面使之皮膚表皮變黑。黑素細胞之間，黑色素合成的過程如下。以細胞內的酪氨酸作為基質，酪氨酸酶的作用下生成多巴醌，從多巴醌變成多巴色素之后進一步氧化成5，6-二羥基吲哚(DHI)和5，6-二羥基吲哚-2-羧酸，這些生成物聚合最終生成共聚體黑色素。現有的大部分黑色素生成抑制劑為酪氨酸酶活性抑制劑。到目前為止已開發出的，酪氨酸酶活性抑制劑中代表性的有曲酸、單寧白蛋白、氫醌及Vc等等化學物質和天然提取物。
最近廣泛進行著酪氨酸酶及其膠質細胞和黑素細胞之間的關系方面的研究。大部分發表了由于受到紫外線刺激的角質細胞中放出的細胞分裂素-例如內型雌酮、前列腺素、一氧化氮、促黑激素等刺激黑素細胞而引起沉積色素等等內容的論文。
于是，本發明用抑制色素沉積的方法來消除能引起過多形成黑色素的紫外線等刺激，或者要抑制由紫外線引起的黑色素生成誘導因子的生理活性及生物體內的合成。特別是想找出能抑制由黑激素引起生成黑色素的物質。
促黑激素是由于紫外線或懷孕而產生。這是與黑素細胞的受體結合而促進黑素細胞活性、酪氨酸酯的活性及黑素細胞的樹枝狀突起的生成來促使黑色素生成的激素。于是，用抑制由紫外線引起的色素的沉積的方法來抑制促黑激素的方法將成為抑制皮膚色素沉積來達到皮膚美白效果的重要方法。當前化妝品界需要這種活性物質的開發。

發明內容
本發明的目的是提供一種從川芎分離出的酞內酯6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的組成物。該組成物具有抑制促黑激素活性的效果來抑制黑色素的產生從而達到皮膚美白的效果，并發現含這種組成物的化妝品組成成分具有很好的美白效果。
本發明的目的是提供抑制促黑激素的活性組成物。
本發明的另一個目的是提供皮膚美白用化妝品的組成物。
本發明的另一個目的及優點是通過通過下面的敘述及附加要求來明確。
本發明的目的是這樣實現的一方面，本發明是提供含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A有效成分的皮膚美白用化妝品組成成分。另一方面，本發明提供含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A有效成分的抑制促黑激素的組成物。
發明是根據目前化妝品界的需求而努力開發抑制促黑激素活性效果的物質。從川芎中分離出多種單體。鑒定有抑制促黑激素活性效果物質結果，確認其中的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A有上述的活性。這種抑制促黑激素活性效果是尚未報道的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的新用途。
存在于自然界的酞內酯一中的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的化學式如下[化學式1] 本發明的特點是發明中的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A是從天然原料川弓中分離出來的。上述的川芎是傘形科多年生草本植物，有日川芎和韓國產川弓。
上述的川芎含有多重酞內酯。例如已確認日川芎含有藁木內酯、亞丁基態內酯、6，7-二氫-3-丁基酞酯A及6，7-二氫-3丁基酞酯H等。從韓國川芎中分離出3-丁基酞內酯、3-亞丁基態內酯、3-亞丁基-4-羥基酞內酯、新蛇床內酯，Z-藁木內酯、E-藁木內酯、6，7-二氫-3-丁基酞內酯A、F、H、I等。
從這些川芎中分離出的單體中本次發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A有抑制促黑激素活性的新用途。因此，比那些抑制酪氨酸酶的生物合成來抑制酪氨酸酶活性而達到美白效果的美白劑顯示出更優秀的美白效果。而且本次發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A在比川芎提取物更低的濃度中顯示出上述活。所以更好的美白物來使用。
在本發明中可以利用川芎的多種藥用部位。如根、葉、花、莖、果實及種子等。最好的是根。
本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A是從川芎提取物中分離出來的。上述川芎提取物是以a)水b)無水或含水的含一個到四個碳的低級醇(甲醇、乙醇、丙醇、丁醇)c)上述低級醇和水的混合溶劑d)丙酮e)乙酸乙酯f)氯仿g)1，3-亞丁基-1，2-乙二醇h)乙酸丁酯等作為提取溶劑來提取。本發明的川芎提取物利用含水的低級醇，最好是用乙醇得到的。另外除了上述溶劑之外利用其他提取溶劑也能達到相應的效果。
本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A從川芎提取物利用已知的方法也可以分離精制。例如，上述6，7-二氫-3-丁基酞內酯A可以用多種色譜法，如，氣相色譜(GC)，高效氣相色譜(HSGC)，液相色譜(LC)，高效液相色譜(HPLC)及薄層層析(TLC)等方法來分離精制。
另外，本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A除了從川芎提取物中分離得到的之外，也可以使用以化學方法合成的。
本發明中作為有效成分的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的重量百分比是0.00001～20％，更好的重量百分比是0.0000～10％。如果，重量百分比不到0.0001％時很難產生效果，重量百分比超過20％是很有可能刺激皮膚，并對產品外觀也有影響。
本發明中除了作為化妝品組成物中有效成分的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A之外還包含著普遍利用為化妝品組成物的成分。例如，抗氧化劑、穩定劑、加溶劑、維生素、顏料以及香料等通常的輔助劑和上述輔助劑的混合物。
本發明的組成物可以制成目前流通的任何一種化妝品劑型。例如能制成，溶液、懸浮液、乳狀液、膏狀、凝膠、奶液、粉、香皂、含表面活性劑的清潔劑、油、干粉、粉底乳液、濕粉、及噴劑等劑型。不僅僅是限定在這些劑型，還可以制成柔膚水、爽膚水、奶液、營養霜、按摩膏、精華素、眼霜、潔面膏、潔面皂、潔面水、面膜、噴劑或者粉沫等劑型。
本發明的劑型是膏狀、奶液、凝膠狀時可以利用動物油、植物油、蠟、石蠟、龍須、纖維素衍生物，聚乙二醇、硅氧烷、膨潤土、硅石、滑石還有氧化鋅等作為混合成分。
本發明的劑型是粉或噴劑時可以利用乳糖、滑石、硅石、氫氧化鋁、硅酸鈣或者聚酰胺粉末等作為混合成分，特別是噴劑的情況時追加含氯氟烴、丙烷/丁烷或者二甲醚等促進劑。
本發明的劑型是溶液或者乳狀液時，可利用加溶劑或者乳化劑作為混合成分，如水、乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲醇芐酯、聚丙二醇、1，3-丁基乙二醇、甘油脂肪酯、聚乙二醇或者脫水山犁醇脂肪酸酯等。
本發明的劑型是懸浮液的時作為混合成分的有水、乙醇或聚丙二醇等液相稀釋劑，如乙氧基硬脂醇、聚氧乙稀山梨糖醇脂及聚氧乙烯脫水山梨糖醇酯的懸浮液，還有微晶纖維素，偏氫氧化鋁，膨潤土瓊脂或者龍須等。
本發明的劑型是含表面活性劑的潔面劑是可利用脂肪醇硫酸酯，脂肪醇醚硫酸酯、磺基丁二酸單酯、羥乙磺酸鹽，咪唑鎓鹽衍生物，牛磺酸甲酯，基氨酸酯，脂肪酸酰胺醚硫酸酯，烷基酰胺甜菜堿，脂肪醇，甘油脂肪醇酯，脂肪酸二乙醇酰胺，植物油，羊毛脂衍生物或者乙氧基甘油脂肪酸酯作為混合成分。
本發明由于是從川芎分離出的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的新型用途，顯示出抑制促黑激素活性的效果，并提供含以此為有效成分的促黑激素活性的抑制用組成物，及美白用化妝品的組成物。本發明的組成物在相對低的濃度中顯示出搞得抑制促黑激素活性效果顯示出更好的皮膚美白效果。
下面將通過具體的實例對本發明作進一步詳細說明。但要注明的是這些實例僅僅是為了更具體說明本發明的例子而已，并不代表本發明所限定的權利保護范圍，本發明的保護范圍應以權利保護范圍為準。
具體實施例方式
實例材料川芎根是從韓國漢城慶動市場購買，用于提取物制造與有效成分的分離。
實例16，7-二氫-3-丁基酞內酯A的分離及其精制把3Kg干燥的川芎根粗粉用18L乙醇浸泡3-5天，用濾紙No.5過濾后用帶有冷凝管的減壓旋轉蒸發器完全干燥。干燥的粉末水溶液用乙酸乙酯萃取后再減壓蒸發。得到的萃取物利用敞開硅膠柱得到Rf值是0.5的分離液，減壓蒸餾得到30.1g。這里的Rf值是利用薄層層析通過實驗來得到的結果。為了精制上述減壓得到的物質利用薄層層析法來分離出化合物后減壓蒸餾后利用真空泵除去殘余溶劑得到3.1g6，7-二氫-3-丁基酞內酯A。Exact Mass192.12；ms(m/z(％))192(17.19)，163(1.91)，135(3.57)，107(100)；1H NMR 6.21(dt)，5.91(dt)，4.93(dd)，2.47-1.39(m)，0.9(t)；IR 2932，2872，1747，1241cm-1；UV(207，278nm)。
實驗例1用6，7-二氫-3-丁基酞內酯A對促黑激素活性的抑制作用而達到抑制黑色素生成的效果在上述實例1中分出的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A對抑制促黒激素活性而抑制黑色素生成效果的實驗如下黑素細胞是從實驗用鼠黑素瘤菌株B-16(ATCC CRL6323)得到的。把黑素瘤菌株接種在含有4.5g/l葡萄糖，10％血清及1％抗生素的增濕恒溫箱(DMEM)里，用50ml T-圓底燒瓶在37℃下培養。在5％CO2條件下培養24小時后處理含0.02％EDTA0.05％胰蛋白酶，分離細胞，在100培養皿小處理成5×104細胞/皿培養。培養24小時候在各培養皿里添加100uM促黒激素(a-MSH，sigma，美利堅合眾國)后各加入5，10，20，及50ug/ml的上述6，7-二氫-3-丁基酞內酯A。培養5日后利用給培養皿里的細胞數來定量得出黑色素的量。先用5％三氯乙酸(TCA)處理，攪拌，離心分離得出的沉淀物黑色素用磷酸緩沖鹽水(PBS)洗滌，然后用1N NaOH溶解后測定在475nm波長中的吸光度。黑色素的濃度是由合成黑色素(sigma，美利堅合眾國)標準濃度曲線來決定。再求各個濃度萃取物的黑色素生成抑制率。
上述實驗結果見表一[表1]


如上表1所示，促黒激素在處理過的黑素細胞中黑色素的生成率隨著本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A濃度的增大而減小。若濃度在50ug/ml以上時促黒激素的生成率比在未處理的黑素細胞中黑素的生成率(100％)更低。于是，可以知道本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A很好的抑制促黑激素活性而有抑制黑素生成的作用。
實驗例2確認6，7-二氫-3-丁基酞內酯A抑制酪氨酸酶生成與否與實驗例1相同的方法來培養黑素細胞后把5、10、20、及50ug/ml的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A注入到各個培養皿里。培養三日后的細胞用丁二酸-1，4-丁二醇聚酯緩沖溶液洗滌兩次后用0.1％三酮X-100處理，再用超聲波反應30秒。反應液用高速圓心分離機(12,000rpm，30分，4℃)分離細胞碎片和上清液。傾出上清液，用電泳法分出蛋白質加入含0.2％多巴反應液中反應8個小時后確認個凝膠中的酪氨酸酶的生成量。實驗結果見表2。


如表2所示，如上表1所示，促黒激素在處理過的黑素細胞中酪氨酸酶的生成率隨著本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A濃度的增大而減小。若濃度在50ug/ml以上時促黒激素顯示出與在未處理的黑素細胞中酪氨酸酶強度幾乎相等的強度。于是，可以知道本發明的6，7-二氫-3-丁基酞內酯A很好的抑制促黑激素活性而有抑制酪氨酸酶的自然合成，比已有的抑制酪氨酸酶活性來抑制黑素生成的美白劑顯示出更好的抑制黑素生成的效果。
以下，作為本發明的劑型雖然列出了，柔膚水、收斂水、奶液、營養霜、按摩膏、精華素及面膜等。但含本發明組成物的化妝品的劑型不是僅限于這些的。
劑型例劑型例1柔膚水含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的柔膚水的劑型例同下表3[表3]

劑型2收斂水含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的收斂水的劑型例同下表4[表4]

劑型例3奶液含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的奶液的劑型例同下表5[表5]

劑型例4營養霜含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的營養霜的劑型例同下表6

劑型例5營養霜含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的營養霜的劑型例同下表7[表7]

劑型例6精華素含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的精華素的劑型例同下表8[表8]

劑型例7面膜含6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的面膜的劑型例同下表9[表9]

實驗例3本發明中化妝品組成物的美白效果評價本發明中化妝品組成物的美白效果是通過實用試驗評價的。利用上述劑型例4中含1.5％6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的營養霜及劑型例4中用精制水來代替6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的奶液(比較例)來評價各個的美白效果。
30-40歲女性20名利用紫外照射器引起皮膚黑色素的沉積。把她們任意分成兩格組每天早晚各兩次洗完后在胳膊上肘上摸適量的劑型例4及比較例的營養霜連續兩個月。用肉眼觀察在胳膊上肘的改善來評價美白效果的。此結果表現在下表10[表10]

如上表10所示，可以知道本發明中化妝品的組成料比比較例的組成物有更高的皮膚美白效果。而且，在把本發明物使用在皮膚的大部分被檢查者上觀察不出對皮膚的刺激。
權利要求
1.一種皮膚美白用化妝品成分的組成物，其特征在于含以6，7-二氫-3-丁基酞內酯A為有效成分的皮膚美白用化妝品組成物。
2.一種皮膚美白用化妝品成分的組成物，其特征在于含以6，7-二氫-3-丁基酞內酯A為有效成分的促黑激素活性抑制用組成物。
3.根據權利要求1或2所述的皮膚美白用化妝品成分的組成物，其特征在于6，7-二氫-3-丁基酞內酯A是以從天芎分離出的組成物。
4.根據權利要求1或2所述的皮膚美白用化妝品成分的組成物，其特征在于6，7-二氫-3-丁基酞內酯A是采用化學合成獲得的組成物。
5.根據權利要求1所述的皮膚美白用化妝品成分的組成物，其特征在于6，7-二氫-3-丁基酞內酯A的含量占組成物總重量0.00001～20.0％。
6.根據權利要求1所述的皮膚美白用化妝品成分的組成物，其特征在于美白化妝品組成物的劑型可以是溶液，懸浮液，乳狀液，膏狀，凝壯，奶液，護膚液，粉，香皂，含表面活性劑的清潔劑，油，干粉，粉底液，濕粉或噴劑。
全文摘要
本發明是關于皮膚美白用化妝品成分的組成物，更確切的說是關于6，7－二氫－3－丁基酞內酯A的皮膚美白用化妝品組成成分。本發明是提供從川芎中分離出的6，7－二氫－3－丁基酞內酯A的新用途。既有抑制促黑激素活性提供把6，7－二氫－3－丁基酞內酯A作為有效成分的抑制促黑激素活性的組成成分及皮膚美白用化妝品的組成成分。本發明中提出的成分在相對低濃度中也產生高的阻礙促黑激素的活性的效果，進而表現出更好的皮膚美白效果。
文檔編號A61K8/30GK1493270SQ03103468
公開日2004年5月5日 申請日期2003年1月28日 優先權日2002年10月29日
發明者李康泰, 李正魯, 鄭志憲, 李泳振, 李承芝 申請人:高麗雅娜化粧品股份有限公司, 高 雅娜化 品股份有限公司