專利名稱：用橙提取液清除自由基的方法
技術領域：
本發明涉及通過將橙提取液摻入一種組合物中來清除自由基的方法。
自由基的有害作用在許多情況下是已知的并且在不斷地被研究。例如，據信皮膚變壞的原因之一就是形成皮膚的各要素如纖維、細胞和酶中形成自由基。自由基的形成可以部分地由陽光的外部輻射作用引起。這樣形成的自由基可以通過鏈反應攻擊皮膚的各要素，只要自由基存在，例如只要自由基不與產生穩定分子的物質(一般被稱為清除劑或抑制劑)結合，所述的鏈反應就會繼續。這些自由基在皮膚體被水平的不利作用可以引起細胞DNA的破壞和結締組織(膠原和彈性硬蛋白)的侵蝕。這樣，皮膚顯得更老。
因此，不斷地在尋找可以在自由基鏈反應期間阻斷或抑制自由基形成的物質。目前，熟知的清除劑(也稱作抑制劑或抗氧劑，如在下述說明書和所附的權利要求書中所用的都應該被認為是與清除劑是同義的)包括酚類、芳香胺類、硫化合物類、生籽油(raw seed oils)、麥胚油、生育酚類和樹膠類。也據信磷酸、檸檬酸和抗壞血酸各自具有清除活性或增強上面提到的已知清除劑的活性。
這樣，法國申請2,597,337-A2描述了一種化妝品，它通過襲擊自由基而減慢老化過程。該化妝品包括第一水溶性活性成分，它可以包括維生素C源如巴巴多斯櫻桃提取液，和第二脂溶性成分，它包括自由基清除劑如維生素E。
雖然上面的法國申請描述了巴巴多斯櫻桃提取液的應用，但它具體是關于維生素C的存在，已知與其它天然源的維生素C源比較時它的維生素C的含量較高。同樣，日本公開申請2-200610和70-61915描述了從艾西羅拉的果實中得到的提取液可以摻入化妝品中。這些申請教導了巴巴多斯櫻桃含有維生素C或抗壞血酸，并且申請號為2-200610的申請描述了含有至少1％L-抗壞血酸的提取液，正是L-抗壞血酸的存在提供了所需的增白作用。這并不使人驚奇，因為人們熟知L-抗壞血酸可以提供增白作用。
然而，沒有人認識到基本上不含維生素C的橙提取液具有自由基清除活性。本發明人現已發現，橙提取液顯示出自由基清除活性，因此可以發現在制備藥物、食品和農用組合物中及更特別是在供皮膚外用的化妝品中的特殊的用途。因此，在本發明中用于清除自由基的橙提取液的能力是令人驚奇的和出人意料的。
本發明的目的是提供抑制自由基形成或清除自由基存在的組合物。本發明還注視到含有已知自由基清除劑的組合物可以通過摻入橙提取液來增強。這樣，本發明包括含有自由基清除劑的類型的組合物，其改進是加入了橙提取液。優選地，所述組合物是適于人皮膚使用的化妝品組合物。例如，橙提取液可以單獨起作用或與皮膚增白劑一起用作皮膚增白劑。
本發明還包括一種在組合物中提供自由基清除活性的方法，包括將有效量的橙提取液混入組合物中以增強組合物的自由基清除活性。
已知在由分子氧引起的氧化反應期間產生的過氧化物離子是非常活潑的并且具體攻擊蛋白質和核酸。因此，本發明基于橙提取液對過氧化物基團的抗自由基活性。本發明的摻入了橙提取液的組合物特別適用于保護皮膚，這特別是由于其對抗光線損害反應和UV攻擊的保護。
本發明還包括一種在人皮膚中清除自由基的方法，包括局部施用于皮膚一種包含橙提取液的組合物。優選地，該組合物還包含可藥用的載體。
用于本發明的橙提取液基本上不含有抗壞血酸，并且僅含有少量的有機酸，特別是羧酸。
本說明書和所附的權利要求書中所用的術語“基本上不含有抗壞血酸”是指存在于橙提取液中的任何抗壞血酸的量不超過橙提取液的大約1％重量，優選地不超過大約0.1％，更優選地不超過大約0.01％。最優選地，如果存在的話，抗壞血酸的量不超過橙提取液的大約0.005％。
本說明書和所附的權利要求書中所用的術語“少量的有機酸”和“少量的羧酸”是指任何有機酸和任何羧酸，包括飽和的和不飽和的羧酸和二羧酸、羥基單羧酸、羥基二羧酸和羥基三羧酸，其存在的量不超過橙提取液的大約5％重量，優選地不超過大約3％，更優選地不超過大約2％。
在本發明的組合物中，所用的橙提取液的量不可以絕對化，因為它隨制備物的形式而變。然而，一般的用量基于組合物的總重量為大約0.01％至大約50％、優選大約0.01％至大約5％、理想的是大約0.05％至大約2％、更優選的是大約0.1％至大約1％。
請注意，除非另有說明，在本說明書和所附的權利要求書中給出的所有百分數均指重量百分數。
按照本發明，提供了一種包含橙提取液作為活性成分的自由基清除劑組合物。
然而，在本發明中，所述的橙提取液基本上不含有任何實質量的維生素C(抗壞血酸或其衍生物)。換句話說，橙提取液中不含有超過大約1％重量、優選地不超過大約0.1％、更優選地不超過大約0.01％。最優選地，如果存在的話，所述抗壞血酸的量不超過橙提取液的大約0.005％。
可以以任何合適的方法制備橙提取液以得到基本上不含抗壞血酸的提取液。優選地，橙提取液從橙皮、花和/或橙樹上的葉得到。據信橙提取液通過下述方法制備，即干燥所述原料，預處理之，通過交替浸漬和滲濾24-48小時以冷提取預處理后的原料、過濾、微孔過濾以及加入適當的防腐劑如parabens或苯氧基乙醇。最優選地，橙提取液是得自Centerchem，Inc.的Bitter Orange Peel Extract HB或得自Cosmetochem的Herbasol Orange Extract。據信Centerchem的原料得自橙皮，而Cosmetochem的原料得自橙花。
在本發明的組合物中，所用的橙提取液的量不可以絕對化，因為它隨制備物的形式而變。然而，一般的用量基于增白劑組合物的總重量為大約0.01％至大約50％、優選大約0.01％至大約5％、理想的是大約0.05％至大約2％、更優選的是大約0.1％至大約1％。
本發明的組合物可以以各種形式制備。例如，它可以是化妝品制備物形式如乳膏、化妝洗劑、包裝物或粉劑，或作為乳液、洗劑、搽劑或軟膏。在各種制劑中，可以摻入各種已知的常規化妝品成分。例如，摻入化妝品成分如醇類、脂和油類、表面活性劑、脂肪酸、硅油類、濕潤劑、粘度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料。
在本發明的組合物的另一方面，提供了改進的自由基清除組合物，其中改進包括加入橙提取液，如上面充分定義的。在該方面，將橙提取液加到如皮膚增白組合物中是理想的。在該情況下，橙提取液的自由基清除活性可以抑制多巴醌(dopaquinone)的轉化，結果抑制了eumelanin的產生。因此，預期橙提取液的自由基清除活性可以增加已知的酪氨酸酶抑制劑，并因此提供增強的皮膚增白性質。
本發明也提供了一種增強已知的自由基清除劑的自由基清除活性的方法，它包括將橙提取液加到含已知的自由基清除劑的組合物中。
本發明也包括一種在組合物中提供自由基清除活性的方法，包括將有效量的橙提取液混合到所述的組合物中以增加組合物的自由基清除活性。
在本發明的另一方面，提供了一種在人皮膚中清除自由基的方法，它包括將橙提取液局部施用給皮膚。更優選地，該方法包括將包含橙提取液和可藥用的載體的組合物局部施用給皮膚。術語“可藥用的”是指那些藥品、藥物或適于與人或低等動物的組織接觸使用的而無不適當的毒性、不相容性、不穩定性、刺激等的、與合理的效益/危險比相稱的惰性成分。
為了說明本發明的橙提取液的自由基清除活性，進行了描述在Cosmetics & Toiletries，Vol.10，pp.51-56，Oct.1995中的試驗。
量去39.43mg 2，2-二苯基-1間三硝苯基偕腙肼水合物(DPPH)，一種已知的自由基源，用乙醇稀釋到1000ml。對照比色杯中加入1.75ml對照物和1.75ml乙醇。空白比色杯中加入3.5ml乙醇。將各比色杯置于爐中于37℃放置30分鐘。將空白比色杯置于參比槽中而將對照比色杯置于樣品槽中用UV/vis分光光度計測定516nm處的吸光度。
實施例1按照上述方法制備橙提取液。試驗比色杯中裝入1.75ml對照溶液和1.75ml 1％的橙提取液溶液。參比比色杯中裝入1.75ml橙提取液和1.75ml乙醇。將各比色杯置于爐中于37℃放置30分鐘。將試驗比色杯置于樣品槽中而將參比比色杯置于參比槽中以如上方式測定的吸光度。
將自由基清除活性作為對自由基產生的抑制百分數用下式計算百分抑制＝100×[1-(DT/DR)]DT是相對于參比比色杯測得的試驗比色杯的吸光度，而DR是相對于空白比色杯測得的對照比色杯的吸光度。
橙提取液顯示出52％的抑制。
該試驗表明，橙提取液具有抗自由基活性，因此可以預期當摻入組合物中時顯示出有益的結果。
實施例2以實施例1中所述的方法進行清除活性試驗，但使用下述物質的1％溶液(a)醋酸生育酚，(b)薔薇果油，(c)噻克索酮，和(d)Lanachrys2B。結果示于下表1中。
表1
應該理解，可以對上述具體實施方案進行寬范圍的變化和改進。因此，上述說明書是說明而不是限制本發明的，而且它是下述權利要求，包括所有的相等物，限定本發明。
權利要求
1.包含橙提取液的自由基清除組合物。
2.權利要求1的組合物，其中橙提取液含有少于約1％重量的抗壞血酸。
3.一種化妝品組合物，它為洗劑、泡沫、霜劑(creme)等形式，其改進之處是包含有效量的橙提取液以提供對過氧化物基團的抗自由基活性。
4.權利要求3的組合物，其中橙提取液含有少于約1％重量的抗壞血酸。
5.一種在組合物中提供抗自由基活性的方法，包括向組合物中混入有效量的橙提取液以增加組合物的抗自由基活性。
6.權利要求5的方法，其中橙提取液含有少于約1％重量的抗壞血酸。
7.權利要求6的方法，其中所述組合物選自藥物、化妝品、食品和農用組合物。
8.一種清除人皮膚中自由基的方法，包括施用包含橙提取液的組合物。
9.權利要求8的方法，其中橙提取液含有少于約1％重量的抗壞血酸。
10.一種包含皮膚增白劑的皮膚增白組合物，其改進之處是包含有效量的橙提取液。
11.權利要求10的組合物，其中橙提取液含有少于約1％重量的抗壞血酸。
全文摘要
本發明涉及橙提取液用于制備具有抗自由基活性的藥物、化妝品、食品和農用組合物的應用。所述的橙提取液基本上不含有抗壞血酸。
文檔編號A61K8/00GK1200922SQ98109339
公開日1998年12月9日 申請日期1998年5月28日 優先權日1997年5月30日
發明者J·M·多爾諾夫, M·B·達維斯 申請人:美國安利有限公司