專利名稱：一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法。
(二)
背景技術：
吐溫-80,即聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯，分子式為C64H124026,結構式如下
々(OCH2CH2) xOH
HO (CH2CH20) w
CH (OCH2CH2) vOH 0
I — II
CH20 (CH2CH20) z-iCHzCHjO-C-CHs (CH2) 5CH2CH=CHCH2 (CH2) 6CH3
其中x+y+z+w=20
吐溫-80為 一種非離子型表面活性劑，為淡黃色至橙黃色的粘稠液體。易溶于水、曱醇、乙醇和醋酸乙酯，在礦物油中極微溶解，具有較強的親
水性，為藥物制劑中常用的輔料之一。由于其結構中具有較長的碳鏈結構，對親脂性藥物有較好的增溶作用，在制備難溶性藥物制劑時，常用作增溶劑、乳化劑和穩定劑，也常用于注射劑的生產。國內目前有多種藥物的注射劑中使用該輔料作為增溶劑，涉及化學藥品和中藥注射劑，劑型包括粉針劑、小針和大輸液。該輔料靜脈用于人體具有一定的安全性，可因為生產廠家的工藝條件有所不同而導致其產品的LDso的不同。如從多家生產吐溫廠家獲得的樣品的實驗表明小鼠靜脈注射的LDw在5.5~7.8g/kg之間。
在動物的藥理實驗中也發現吐溫-80可能對心血管系統有一定的影響。在一些來自臨床的不良反應才艮告中，在輸注含吐溫-80的注射劑時出現類似過敏反應，血壓降低，心率加快等癥狀。因此，在使用吐溫-80時，
4了解該輔料的生產工藝，加強質量控制，非常關鍵。
吐溫-80的生產工藝將加熱后的司盤和催化劑(溶液)按配比量加入到不銹鋼反應釜中，然后升溫至80 120。C開始真空減壓脫水，水分脫凈后，用0.2 0.4MPa以氮氣置換2 3次，然后繼續升溫至150~170°C,通入環氧乙烷，并維持反應釜內壓力不再下降，即可排空，置換，然后降溫至80。C左右，用水醋酸中和至pH6 8,必要時脫色，取樣分析，出料，包裝。在合成過程中，工藝條件控制的不同會產生不同的雜質，如環氧乙烷的副產物2-氯乙醇、乙二醇、二甘醇、二氧六環和環氧乙烷本身，上述雜質具有一定的毒性。高純度的吐溫-80合成所采用的原料油酸需要控制其它脂肪酸，如肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、^J旨酸、亞油酸、亞麻酸， -使主要脂肪酸油酸達到58.0%~85.0%。在各國的藥典中其標準控制有所不同，中國藥典和美國藥典基本一致，歐洲藥典和英國藥典較中國藥典更為嚴格，日本藥房方劑更為嚴格。具體體現在對上述雜質的控制項目與限量值有所不同。對靜脈制劑所用的吐溫-80,歐洲藥典明確M^定了應增加斗企查熱原項，而其他藥典則無此項身見定。
發明內容
本發明目的是提供一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法。通過吐溫-80在使用前進行精制后，再用于藥品的配制，降低靜脈注射劑在臨床使用后不良反應率，大大提高注射液的安全系數。
本發明采用的技術方案是
一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法，所述方法包括將純化后的人體可接受的注射用藥液與精制后的吐溫-80混合，并添加注射用水至吐溫-80終濃度為l~5g/L,得到所述注射液；所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度10 30%的溶液，煮沸后保持微沸5 10分鐘后，冷卻至70 80。C加入1 5g/L的活性炭(即每升溶液加入l 5g活性炭)，攪拌降溫至50 60°C,過濾，得精制后的吐溫-80水溶液。本發明方法關鍵是在注射液配制之前對吐溫-80進行精制處理，可適用于所有以吐溫-80為增溶劑的中西藥注射液的制備，所述純化后的人體可接受的注射用藥液為按照本領域常規方法獲得的中藥提取液經純化后的清液或者藥物化合物的溶解液，其中還可添加必要的助劑，如等滲調
節劑、pH調節劑、穩定劑等，其中藥提取液及藥物化合物用量為常規用量，可根據實際需要在合理范圍內進行調整。所述等滲調節劑可為NaCl或葡萄糖。優選的，所述等滲調節劑為NaCl,在注射液中終濃度為9g/L。
具體的，本發明方法可用于下列注射液的配制野木瓜注射液、熱可平注射液、桑姜感冒注射液、骨癆敵注射液、復方蒲公英注射液、復方蛤青注射液、復方當歸注射液、苦木注射液、抗腮腺炎注射液、當歸寄生注射液、丁公藤注射液、穿心蓮注射液、白花蛇舌草注射液、伊痛舒注射液、補骨脂注射液、魚金注射液、魚腥草注射液、香丹注射液、柴胡注射液雪蓮注射液、醒腦靜注射液、健骨注射液、去感熱注射液、莪術注射液、新魚腥草素鈉注射液、胺石典達隆、參麥注射液、川芎注射液、燈盞細辛注射液、雙黃連注射液、苦參注射液等中西藥注射液。
具體的，所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成
質量濃度20%的溶液，煮沸后保持微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L
的活性炭，攪拌降溫至5CTC,過濾，以注射用水稀釋至一定濃度，得精
制后的吐溫-80水溶液。
藥品生產廠在使用符合中國藥典標準的吐溫-80時，并不能非常有效
地清楚該產品的安全性，因此，除對吐溫生產廠家的工藝、質量考察顯得
非常重要外，對吐溫-80增加精制工藝必不可少。事實證明精制工藝可以
除色、除熱原等雜質，小鼠急性半數致死量試驗、體外細胞毒性試驗證明
精制工藝有明顯的降低毒性作用；大大提高吐溫的安全系數。優選的，所述注射液中還添加有等滲調節劑，所述等滲調節劑為NaCl 或葡萄糖。更為優選的，所述等滲調節劑為NaCl,在注射液中終濃度為 9g/L。
優選的，所述注射液為^爭月永注射液或月幾肉注射'液。 以注射液為參麥注射液為例，所述參麥注射液每1000mL按如下方法 制備
(1)取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度20%的溶液，煮沸后保持 微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至 50°C,過濾，補加注射用水至吐溫-80質量濃度為20%,得精制 后的吐溫-80水溶液；
(2 )紅參提取液制備取紅參1000g加乙醇2000mL浸漬后，回流 提取6次.每次2小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇， 冷藏、濾過，濾液加入400mL注射用水，冷藏備用；
(3 )麥冬提取液制備取麥冬1000g加乙醇2500mL浸漬后，回流 提耳又2次，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷藏、濾過， 濾液入400mL的注射用水，冷藏備用；
(4)取上述紅參、麥冬提取冷藏液分別過濾，合并濾液，加入精 制后的20%吐溫-80水溶液25g，邊加邊攪拌直至完全均勻， 用注射用水補足至1000mL混勻，濾過，灌封，滅菌，即得參 麥注射液。
所述注射液為魚腥草注射液時，所述魚腥草注射液每1000mL按如下 方法制備
(1 )取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度20%的溶液，煮沸后保持孩i 沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50°C ,
7過濾，補加注射用水至吐溫-80質量濃度為20%,得精制后的吐溫 -80水溶液；
(2 )取新鮮魚腥草2000g進行水蒸氣蒸餾，收集初餾液再次進行重蒸餾， 收集重蒸餾液，加入7g氯化鈉及步驟(1 )精制后的吐溫-80水溶 液25g，混勻，加注射用水補足至1000mL,得到所述魚腥草注射液。 本發明的有益效果主要體現在按照本發明精制方法，精制后的吐溫 -80相對于未經精制的吐溫-80，毒性明顯降低，大大提高了吐溫-80的安 全系數，利用精制后的吐溫-80制備注射劑尤其是靜脈注射劑，得到注射 劑在臨床使用后不良反應率下降，增加了臨床用藥的安全性。 具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護范圍 并不僅限于此
實施例1:吐溫-80的精制
耳又吐溫-80加注射用水配制成質量濃度20%的溶液，煮沸后保持樣l沸 5分鐘后，冷卻至80。C加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50。C,過濾，濾 液補加注射用水至吐溫-80質量濃度為20%,得精制后的吐溫-80水溶液。
實施例2:吐溫-80的精制
取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度15%的溶液，煮沸后保持纟鼓沸 8分鐘后，冷卻至85。C加入3g/L的活性炭，攪拌降溫至55。C,過濾，濾 液補加注射用水至吐溫-80質量濃度為15%,得精制后的吐溫-80水溶液。
實施例3:安全性試-瞼一、 小鼠急性半數致死量試驗
試驗方法
根據國家食品藥品監督管理局《藥物非臨床研究質量管理規范》和《化 學藥物急性毒性試驗技術指導原則》的方法要求及"小鼠急性半數致死量 試驗SOP-ZJGLP-CZ04-1/3 、 小鼠經靜脈注射給予受試物 SOP-ZJGLP-DW04-17/3"標準操作規程，分別對精制前(1# )和精制后(2#, 實施例1精制產物)的"吐溫-80，，進《亍急性LD5o只于比試-瞼。
實驗結果
清潔級ICR小鼠分別尾靜脈注射(iv)給予編號為1#、 2#的"吐溫-80" 各8.35、 6.68、 5.34、 4.28 g/kg (以吐溫-80純量計)劑量,對小鼠的急性 毒副反應主要為給藥后出現活動減少、俯臥、閉眼、嗜睡、全身無力、 呼吸急促、精神萎靡、反應遲鈍、抽搐等。
小鼠經尾靜脈注射給予1#吐溫-80僅8.35g/kg劑量組出現60%動物死 亡，給予2# "吐溫-80"8.35、 6.68g/kg劑量組分別出現20Q/Q、 10%動物死 亡，其余劑量均未引起死亡；小鼠經尾靜脈注射給予1# "吐溫-80"的急 性半數致死劑量(LD50)約為8.0g/kg;給予2#"吐溫-80"的急性半數致 死劑量(LD5Q)大于8.35g/kg;在本試驗條件下，小鼠尾靜脈注射(iv ) 給予1# 2#"吐溫-80，，急性毒副反應基本相似，毒性大小依次為2#<1#。根 據半數致死劑量(LD5。)的大小，證明了精制工藝有明顯的降低毒性作用。
二、 吐溫-80體外細胞毒性試驗 觀察精制前后的吐溫-80對體外培養的豬髖動脈內皮細胞(P正C)所
產生的毒性反應，通過細胞相對增殖率(RGR)來判定細胞毒性程度。
PIEC細胞在體外給予精制前(編號1#)、精制后(編號為2#,實施 例2精制產物)不同質量濃度(注射用水分別稀釋至1:100、 1:500、 1:2500
9和1:12500 )的"吐溫-80",給予1#吐溫-80的PIEC細胞在給藥后2 d和4 d的RGR分別為4.9% 88.8%和0.4~72.6%;給予2#吐溫-80的PIEC細 胞在給藥后2 d和4 d的RGR分別為8.7 110.0%和1.3~82.6%,以上試驗 結果顯示，在本試驗劑量條件下，對PIEC細胞的毒性為1#吐溫-80給 藥后2 d時為4~1級；給藥后4 d時為5-2級；2#的吐溫-80給藥后2 d時 為4~0級，給藥后4 d時為4-1級，結果顯示2個批次的吐溫-80對PIEC 細胞均有一定的細胞毒性，并呈明顯的濃度和暴露時間關系，濃度低毒 性低，濃度高則毒性高，但2#的吐溫-80的毒性明顯低于1#吐溫-80,證 明了該精制工藝能有效減少細胞毒性。
實施例4:參麥注射液制備
紅參提取液制備取紅參(切片或粗粉)1000g加乙醇2000mL浸 漬后，回流提耳又6次.每次2小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇， 冷藏、濾過，濾液約100mL,加入400mL注射用水，冷藏備用；
麥冬提取液制備取麥冬1 OOOg加乙醇2500mL浸漬后，回流提取 2次，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷藏、濾過，濾液約100mL, 加入400mL的注射用水，冷藏備用；
取上述紅參、麥冬提取冷藏液分別過濾，合并濾液，加入精制后 的20。/o吐溫-80水溶液25g，邊加邊攪拌直至完全均勻，用注射用水補 足至1000mL混勻，濾過，灌封，滅菌，即得參麥注射液。
由精制后吐溫配制的參麥注射液經質量^^驗(質量標準號 WS3-B-3428-98-2004 ),其所有的項目性狀、鑒別、pH值、可見異物， 有關物質蛋白質、鞣質、樹脂、草酸鹽、鉀離子檢查；異常毒性、熱 原、溶血與凝集檢查及含量測定全部指標均合格。
10實施例5:魚腥草注射液制備
取鮮魚腥草2000g進行水蒸氣蒸餾，收集初餾液2000ml ，再進行重 蒸餾，收集重蒸餾液約950ml,加入7g氯化鈉及精制后的25克20%的吐 溫-80水溶液，混勻，加注射用水補足至lOOOml，濾過，灌封，滅菌，即 得魚腥草注射液。
由精制后吐溫配制的魚腥草注射液經質量檢驗，其所有的項目 性狀、鑒別、pH值、可見異物，有關物質蛋白質、鞣質、樹脂、草酸 鹽、鉀離子檢查；異常毒性、熱原、溶血與凝集檢查及含量測定全部 指標均合格。
實施例6:香丹注射液制備
降香1000g加水浸潤，進行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液約500ml,冷藏 24小時，分去油層，水溶液另器收集(約500mL )。丹參1000g加水煎煮 三次，第一次加8倍量水，煎煮2小時；第二、三次各加6倍、5倍量水， 每次煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至670 ~ 760ml,加入乙 醇使含醇量(v/v)達75%,靜置40小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至 約330ml，再加入乙醇使含醇量(v/v)達85%,靜置40小時，于溶液中 按體積加入1%的活性炭，攪拌1小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至200 300ml,加入注射用水1000 ~ 1650ml,靜置16小時，濾過，濾液濃縮至 約330ml，加乙醇使含醇量(v/v)達80%,靜置24小時，濾過，濾液濃 縮至約330ml，加注射用水至約500ml,用10%氫氧化鈉溶液調節pH值 至6.5 ~ 6.0,煮沸1小時，于溶液中按體積加入1%的活性炭，煮沸15分 鐘，濾過，濾液再用10%氫氧化鈉溶液調節pH值至6.8~7.0,加注射用水至約500ml,加入降香蒸餾液和精制后的25克的20%吐溫-80水溶液， 混勾，加注射用水-使成1000ml，濾過，灌封，滅菌，即得香丹注射液。 由精制后吐溫配制的魚腥草注射液經質量^r—險，其所有的項目 性狀、鑒別、pH值、可見異物，有關物質蛋白質、鞣質、樹脂、草酸 鹽、鉀離子檢查；異常毒性、熱原、溶血與凝集檢查及含量測定全部 指標均合格。
權利要求
1.一種以吐溫-80為增溶劑的注射液的制備方法，所述方法包括將純化后的人體可接受的注射用藥液與精制后的吐溫-80混合，并添加注射用水至吐溫-80終濃度為1～5g/L，得到所述注射液；所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度10～30％的溶液，煮沸后保持微沸5～10分鐘后，冷卻至70～80℃加入1～5g/L的活性炭，攪拌降溫至50～60℃，過濾，得精制后的吐溫-80水溶液。
2. 如權利要求l所述的方法，其特征在于吐溫-80精制方法如下取吐溫 -80加注射用水配制成質量濃度20%的溶液，煮沸后保持樣i沸5分鐘后， 冷卻至80。C加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50。C,過濾，以注射用水 稀釋，得精制后的吐溫-80水溶液。
3. 如權利要求1所述的方法，其特征在于所述注射液中還添加有等滲調 節劑，所述等滲調節劑為NaCl或葡萄糖。
4. 如權利要求3所述的方法，其特征在于所述等滲調節劑為NaCl,在注 射液中終濃度為9g/L。
5. 如權利要求1~4之一所述的方法，其特征在于所述注射用藥液為中藥 提取液經純化除雜后的清液。
6. 如權利要求1~4之一所述的方法，其特征在于所述注射液為靜脈注射 '液或月幾肉注射液。
7. 如權利要求1所述的方法，其特征在于所述注射液為參麥注射液，所 述參麥注射液每1000mL按如下方法制備(1)取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度20%的溶液，煮沸后保持 微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50 。C,過濾，補加注射用水至吐溫-80質量濃度為20%,得精制后的吐溫-80水溶液；(2) 紅參提取液制備取紅參1000g力卩乙醇2000mL浸漬后，回流 提耳又6次.每次2小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷 藏、濾過，濾液加入400mL注射用水，冷藏備用；(3) 麥冬提取液制備取麥冬1000g加乙醇2500mL浸潰后，回流 才是耳又2次，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，冷藏、濾過，濾 液入400mL的注射用水，冷藏備用；(4) 取上述紅參、麥冬提取冷藏液分別過濾，合并濾液，加入精制 后的20°/。吐溫-80水溶液25g，邊加邊攪4半直至完全均勻，用注 射用水補足至1000mL混勻，濾過，灌封，滅菌，即得參麥注 射液。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述注射液為魚腥草注射液， 所述魚腥草注射液每1000mL按如下方法制備(1) 取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度20%的溶液，煮沸后保持 微沸5分鐘后，冷卻至8(TC加入2g/L的活性炭，攪拌降溫至50 。C,過濾，補加注射用水至吐溫-80質量濃度為20%,得精制后 的吐溫-80水;容液；(2) 取新鮮魚腥草2000g進行水蒸氣蒸餾，收集初餾液再次進行重蒸 餾，收集重蒸餾液，加入7g氯化鈉及步驟(1 )精制后的吐溫-80 水溶液25g，混勻，加注射用水補足至1000mL,得到所述魚腥草 注射液。
全文摘要
本發明提供了一種注射液的制備方法，所述方法包括將純化后的人體可接受的注射用藥液與精制后的吐溫-80混合，并添加注射用水至吐溫-80終濃度為1～5g/L，得到所述注射液；所述吐溫-80精制方法如下取吐溫-80加注射用水配制成質量濃度10～30％的溶液，煮沸后保持微沸5～10分鐘后，冷卻至70～80℃加入1～5g/L的活性炭，攪拌降溫至50～60℃，過濾，得精制后的吐溫-80水溶液。本發明的有益效果主要體現在按照本發明精制方法，精制后的吐溫-80相對于未經精制的吐溫-80，毒性明顯降低，大大提高了吐溫-80的安全系數，利用精制后的吐溫-80制備注射劑尤其是靜脈注射劑，得到注射劑在臨床使用后不良反應率下降，增加了臨床用藥的安全性。
文檔編號A61K47/34GK101491678SQ20091009595
公開日2009年7月29日 申請日期2009年2月25日 優先權日2009年2月25日
發明者娟 李, 李元瑞, 治 王, 馬珠鳳 申請人:正大青春寶藥業有限公司