專利名稱：重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑及其制備方法
技術領域：
本發明屬于藥物制劑領域，具體涉及一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術：
重組人抗血栓蛋白(RecombinantHuman Anti thrombus Protein)系經大腸桿菌發酵表達的重組DNA制品類抗血栓藥物。它是一種以活化血小板為靶點，將分子聚集在血栓部位，并通過其分子中各主要結構域行使但發揮比之更高效的抗血栓功能，達到全面、高效抗血栓作用的重組蛋白質藥物，同時其靶向性也賦予了該藥物較高的安全性。中國專利文獻CN1286262A公開的人胎盤抗凝蛋白介導的抗凝蛋白即為重組人抗血栓蛋白。重組人抗血栓蛋白的水溶液穩定性較差，將其按2 8°C保存，純度和生物學活性下降較快，保存時間太短。

發明內容
本發明的目的之一是克服上述問題，提供一種穩定性較好的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑。本發明的另一目的是提供上述重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法。實現本發明目的之一的技術方案是一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，它是由重組人抗血栓蛋白、賦形劑、緩沖液以及注射用水制成；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸；所述緩沖液由緩沖劑與PH調節劑組成。相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 19000重量份，甘氨酸為0 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。優選的是，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為0 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS (三羥甲基氨基甲烷)、磷酸鹽中的一種或者兩種。所述pH調節劑為堿溶液或者酸溶液，優選氫氧化鈉溶液或者鹽酸溶液。pH調節劑的量為使冷凍干燥前的溶液的PH值調節至6. 0 9. O。注射用水的重量低于凍干粉針劑總重量的3%。實現本發明另一目的的技術方案是一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，具有以下步驟①將賦形劑和緩沖劑加入到注射用水中溶解；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸；②向步驟①得到的溶液中加入重組人抗血栓蛋白，混合均勻，用PH調節劑將溶液的PH值調至6. 0 9. 0 ;然后加足注射用水；③用微孔濾膜對步驟②得到的溶液進行過濾除菌，得到濾液；④將步驟③得到的濾液按重組人抗血栓蛋白每瓶0. 5 IOmg計，分裝于管制瓶中，置于冷凍干燥機中凍干即可。上述步驟①和步驟②中，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 、19000重量份，甘氨酸為0 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。上述步驟①和步驟②中，優選的是，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為0 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。上述步驟①中所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS (三羥甲基氨基甲烷)、磷酸鹽中的一種或者兩種。上述步驟③中，微孔濾膜孔徑為0. 22 u m。上述步驟④中的凍干過程為先預凍至_40°C，保持60 120min ;然后抽真空，在600min內升溫至(TC，保溫240min ;接著在150min內升溫至25°C，保溫240min ;最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結束凍干。本發明具有的積極效果本發明制得的凍干粉針劑呈多孔狀，克服了常溫下水溶液不穩定的問題，在2 8°C可長期穩定存放，而且重新復水可迅速恢復活性，既有效保證了產品在生產和存放過程的穩定性，又方便臨床使用。
具體實施例方式(實施例I)
本實施例的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑每瓶含有0. 5mg的重組人抗血栓蛋白、20mg的甘露醇、I. 2mg的磷酸二氫鈉。另外，還含有極少量的pH調節劑以及低于凍干粉針劑總重量的3%的注射用水。本實施例的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法具有以下步驟
①準確稱取20g的甘露醇、I. 2g的磷酸二氫鈉，并加入到400g的注射用水中溶解。②向步驟①得到的溶液中加入0. 5g的重組人抗血栓蛋白，混合均勻，用lmol/L的鹽酸溶液將溶液的PH值調至7. 0±0. 2 ;然后加足注射用水至溶液總重量為500g。③用孔徑為0. 22 y m的微孔濾膜對步驟②得到的溶液進行過濾除菌，得到濾液。④將步驟③得到的濾液分裝于1000支管制瓶中，半加塞后置于冷凍干燥機中凍干。具體過程為先預凍至_40°C，保持120min。然后抽真空，在600min內升溫至(TC，保溫240min。接著在150min內升溫至25°C，保溫240min。最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結束凍干。凍干后依次進行真空壓塞、軋蓋、貼標簽，即得凍干粉針劑，并保存在2 8°C。(實施例2 實施例5)
各實施例與實施例I基本相同，不同之處見表I。表I權利要求
1.一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于由重組人抗血栓蛋白、賦形劑、緩沖液以及注射用水制成；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸；所述緩沖液由緩沖劑與PH調節劑組成。
2.根據權利要求I所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 19000重量份，甘氨酸為O 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。
3.根據權利要求2所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為O 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。
4.根據權利要求I至3之一所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS、磷酸鹽中的一種或者兩種。
5.權利要求I所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于具有以下步驟 ①將賦形劑和緩沖劑加入到注射用水中溶解；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸； ②向步驟①得到的溶液中加入重組人抗血栓蛋白，混合均勻，用PH調節劑將溶液的pH值調至6. O 9. O ;然后加足注射用水； ③用微孔濾膜對步驟②得到的溶液進行過濾除菌，得到濾液； ④將步驟③得到的濾液按重組人抗血栓蛋白每瓶O.5 IOmg計，分裝于管制瓶中，置于冷凍干燥機中凍干即可。
6.根據權利要求5所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟①和步驟②中，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 19000重量份，甘氨酸為O 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。
7.根據權利要求6所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟①和步驟②中，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為O 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。
8.根據權利要求5至7之一所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟①中所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS、磷酸鹽中的一種或者兩種。
9.根據權利要求5至7之一所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟④中的凍干過程為先預凍至_40°C，保持60 120min ;然后抽真空，在600min內升溫至(TC，保溫240min ;接著在150min內升溫至25°C，保溫240min ;最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結束凍干。
10.根據權利要求8所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟④中的凍干過程為先預凍至_40°C，保持60 120min ;然后抽真空，在600min內升溫至(TC，保溫240min ;接著在150min內升溫至25°C，保溫240min ;最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結束凍干。
全文摘要
本發明公開了一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑及其制備方法。該重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑由重組人抗血栓蛋白、賦形劑、緩沖液以及注射用水制成。具體方法是將賦形劑和緩沖劑先加入到注射用水中溶解，然后加入重組人抗血栓蛋白，混合均勻，調節溶液pH值為6.0～9.0，接著加足注射用水，用微孔濾膜過濾除菌，將得到濾液按重組人抗血栓蛋白每瓶0.5～10mg計，分裝于管制瓶中，最后置于冷凍干燥機中凍干即可。本發明制得的凍干粉針劑呈多孔狀，克服了常溫下水溶液不穩定的問題，在2～8℃可長期穩定存放，而且重新復水可迅速恢復活性，既有效保證了產品在生產和存放過程的穩定性，又方便臨床使用。
文檔編號A61K38/17GK102631328SQ20121013571
公開日2012年8月15日 申請日期2012年5月4日 優先權日2012年5月4日
發明者吳海燕, 徐小曉, 杭長標, 袁建雷 申請人:常州千紅生化制藥股份有限公司